Методики биотестирования

Методика Н.С. Строганова [51]

Основные положения:

Острый опыт. Предлагаемый метод позволяет определить острую токсичность:

а) сточных вод отдельных цехов предприятий, включая условно-чистые воды;

б) сточных вод на разных этапах очистки;

в) очищенных сточных вод при сбросе в водоем;

г) химических веществ.

Дафнии позволяют определить как качество природных вод, так и токсичность стоков. Показателем острой токсичности является гибель 50% и более дафний в анализируемой воде по сравнению с контролем в течение 24, 48 и 96 часов. Для определения качества природных вод ставятся хронические опыты по методике Л.А.Лесникова длительностью 10-15 суток.

Методика Л.А. Лесникова [49]

Отобранные пробы воды фильтруются через мельничный газ. Опыты можно ставить только после выравнивания температур в пробах и маточной культуре дафний. В каждую пробу с 0,3 л воды помещается по 10 дафний возрастом 6 суток. В течение опыта регулярно, (один раз в двое суток) под бинокуляром отмечается их состояние. Длительность опытов не менее 10суток. В пробы воды корм не добавляется. В ходе опыта воду не заменяют, молодь не удаляют. При просмотрах у дафний регистрируются: размеры (в делениях окулярмикрометра), состояние гонад и эмбрионов в выводковых камерах, их число, окраска тела, наличие и цвет капель жира, наполненность кишечника и его содержимого. У погибших и иммобилизованных дафний регистрируются симптомы гибели (тетаническое сокращение мышц туловища, судорожное опорожнение кишечника, побеление участков тела, яиц или эмбрионов и т.п.).

Результаты опытов позволяют в основном качественно судить о характере изменения условий в водоеме. В качестве руководства в первом приближении можно использовать прикладываемую к методике определительную таблицу, составленную на основании анализа результатов опытов с разными веществами.

Определительная таблица токсического действия веществ и физиологического состояния дафний.

1(2,3) Дафнии гибнут все в течение первых 4 суток. Острое летальное действие 4

2(1,3) Дафнии постепенно гибнут все или частично в сроки от 4 до 15 суток. Хроническое летальное действие 14

3(1,2) Дафнии не гибнут за срок до 15 дней или гибнут отдельные особи. Явной закономерности в сроках их гибели не обнаруживается 19

4(5,6,7) У иммобилизованных дафний исчезают капли жира, окраска тела снижается до 1 балла, наблюдаются (сохраняются) следы перистальтики кишечника, подергивание мышц плавательных антенн, иногда редкие сокращения сердца 8

5(4,6,7), Дафнии скапливаются у поверхности воды в сосуде, окраска тела становится 3м-5м (наблюдается помутнение), погибшие особи либо остаются у поверхностной пленки, либо падают на дно; отдельные мышцы погибших дафний вздрагивают у почти разложившихся особей, туловище у погибших дафний часто и выдвинуто далеко вниз через щель раковины. Гибель наступала от резкого дефицита кислорода (меньше 0,5 мг/л)

6(4,5,7) Наблюдается помутнение плазмы клеток сначала в жаберных отростках ног, затем всего туловища. 12

7(4,5,6) У дафний наблюдается судорожное сокращение мышц туловища, сопровождающееся выдавливанием части яиц или эмбрионов из выводковой камеры. Иногда при этом наблюдается судорожное опорожнение кишечника. Действие органических токсичных веществ с раздражающим типом действия: ряд циклических соединений, например фенолы, и другие, как формалин, нефтепродукты и т. п.

8(9) Дафнии сначала роятся в одном углу сосуда, кувыркаются, затем становятся вялыми и все чаще ложатся на дно. Фильтровальный аппарат их ничем не забит, кишечник либо пуст, либо имеет следы содержимого (баллы 1 и 2). Число яиц в выводковой камере сокращается вплоть до нуля. Развитие отложенных яиц протекает нормально. Дафнии голодают. Действие воды, взятой с олигосапробного участка водоема.

9(8) Фильтровальный аппарат дафний забит сгустками или слизью, животные ложатся на дно. При искусственном осторожном освобождении от такого засорения (препарировальной иглой) и перенесении в хорошие условия дафния может восстановить жизнедеятельность полностью и нормально размножаться. Часто сгустки или нити наблюдаются и на плавательных антеннах и на каудальной игле 10

10(11) Забит только фильтровальный аппарат. В среде содержаться взвеси в количествах делающих невозможным функционирование фильтровального аппарата дафний.

11(10) Забит только фильтровальный аппарат, слизистые комки или нити на плавательных антеннах и на каудальной игле. Вода для опыта взята с полисапробно - мезосапробного участка водоема. Внесено слишком много корма, особенно когда кормят дрожжами.

12(13) Помутнение плазмы наблюдаетя у иммобилизованных дафний. Действие хлоридов и сульфатов натрия и кальция и смесей этих солей.13(12) Помутнение плазмы жабр наблюдаетя у еще плавающих дафний,которые часто ложатся на дно, а затем судорожно всплывают и снова падают на дно. Часто у таких дафний уже прекращено дрожание глаза и сокращение сердца. Действие солей калия, магния аммония и тяжелых металлов.14(15,16,17,18) Дафнии постепенно бледнеют, у них исчезают капли жира, число яиц в выводковых камерах сокращается до 1-2, многие самки становятся бесплодными. Гибель наступает через 5-10 дней но отдельные особи живут и дольше. Дафнии скучиваются в одном углу сосуда и кувыркаются. Вода ля опыта взята с олигосапробного участка водоема. Внесено в опыт очень мало корма.

15(14,16,17,18) У дафний резко повышается балл окраски тела (4-5), которое часто становится несколько мутным, животные поднимаются к поверхности сосуда. Дефицит кислорода в среде порядка 1,5 мг/л.

16(14,15,17,18) У дафний в плавательных антеннах и каудальной игле бактериальные обрастания, балл окраски тела часто повышается; все яйца и эмбрионы в выводковых камерах погибают, часто разлагаются до превращения в сплошную пенистую массу. Вода для опыта взята из - мезосапробного участка водоема. Резкий перекорм дафний.

17(14,15,16,18) У части дафний через разные сроки от начала опыта наблюдается судорожное сокращение мышц туловища и выдавливание частияиц из выводковой камеры. Одни яйца развиваются неправильно, другие яйца гибнут и сбрасываются при линьке со шкуркой (эквузием).Действие хронических доз ряда циклических соединений типа фенолов,нефтепродуктов, инсектицидов и т. п.

18 (14,15,16,17) У дафний отмирает часть яиц в выводковой камере. Значительная часть выметанной молоди тут же погибает. Перед гибелью несколько снижается интенсивность окраски тела. Действие солей тяжелых металлов.19(20,21) Интенсивность размножения дафний понижается, среднее число яиц на самку 3-7. Дафнии бледнеют (1-2 балла), исчезают капли жира. Понижено наполнение кишечника 22

20(19,21) Окраска тела дафний умеренная (2-3 балла) Капли жира имеются. Наполнение кишечника 4-5 баллов. Средняя интенсивность размножения 18-40 яиц на самку 24

21(19,20) Окраска тела дафний яркая (4-5 баллов) 27

22(23) Случаев гибели яиц в выводковых камерах нет. Вода для опытов взята с олигосапробно-мезосапробного участка водоема. В опыты вносится не достаточно корма.

23(22) В выводковых камерах часть яиц гибнет(яйца иногда заметно увеличиваются в размерах) и часто в выводковых камерах одновременно присутствуют яйца и зародыши. Действие небольших концентраций солей тяжелых металлов. Иногда - это действие ухудшения условий среды и причины неясны.

24(25,26) В выводковых камерах все яйца развиваются нормально. Иногда на дафниях появляются эпибионты из водорослей (особенно в опытах с водой из природных водоемов, взятой в летнее время. Вода для опыта взята с - мезосапробного участка водоема. В опыт внесено оптимальное количество корма.25(24,26) У дафний в выводковых камерах часть яиц гибнет и прекращает развиваться, или часть их развивается без линек эмбрионов. После вымета нормально развитой молоди такие яйца сбрасываются на дно сосуда, часть их остается в выводковых камерах сброшенных шкурок. Действие небольших концентраций циклических соединений. В лабораторных опытах может быть следствием того, что дафниям в корм дается пожелтевшая культура водорослей.

26(24,25) У дафний отмирает часть яиц в выводковых камерах. На дафниях обрастания из бактерий, грибков и сувоек. Иногда резорбция яиц в гонадах. Вода для опыта взята с - мезосапробного участка водоема. Небольшой перекорм.

27(28) Обрастаний на дафниях нет, может даже быть довольно много капель жира. Функции размножения не нарушены. В среде пониженное содержание растворенного кислорода (2-3 мг/л).

      Другие статьи

      Проблемы охраны окружающей среды
      Если все время существования нашей планеты условно принять за один год, то человек разумный появился на ней 31 декабря во второй половине дня. Первые древнейшие цивилизации возникли 36 секу ...

      Безопасность жизнедеятельности в туристической сфере (Учебник). 2002. 117 стр.
      Обеспечение безопасности всегда являлось важнейшей проблемой человечества во всех сферах деятельности. Человек с момента своего зарождения подвергается изменяющимся опасностям природного, те ...

      Нефтяные загрязнения
      Вначале человек не задумывался о том, что таит в себе интенсивная добыча нефти и газа. Главным было выкачать их как можно больше. Так и поступали. Но вот в начале 40-х гг. текущего столетия ...